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小鼠_

mouse AFP ELISA KIT(JEM-131)

英文名称:mouse AFP  ELISA KIT
中文名称:小鼠甲胎蛋白
产品货号: JEM-131
检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
规格:96T/48T
经营品牌:安徽巧伊生物
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月
运输条件:低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。

AFP 简介:

α-甲胎蛋白(AFP),类白蛋白超家族成员(白蛋白、维生素D结合蛋白和α-白蛋白)是一种胎儿和肿瘤相关蛋白,被认为是某些癌症和先天性缺陷的标志物。AFP是胎儿发育过程中卵黄囊和肝脏产生的主要血浆蛋白。它被认为是血清白蛋白的胎儿形式。在啮齿动物中,它是66-72 kDa的单链糖蛋白,分子量的3-5%来自糖基化。小鼠AFP与大鼠和人AFP的氨基酸序列同源性分别为81%和65%。

AFP与铜、镍、脂肪酸和胆红素结合,以单体、二聚体和三聚体形式存在。AFP是几种胚胎特异性蛋白之一,在人类胚胎早期1个月时,白蛋白和转铁蛋白的含量相对较少,是一种重要的血清蛋白。它首先在人体内由卵黄囊和肝脏合成(1-2个月),随后主要在肝脏合成。AFP被认为具有免疫抑制活性,调节细胞增殖和凋亡,启动细胞内信号传导,并参与细胞侵袭。

胎儿和母体AFP水平的改变与一些先天性异常有关,包括甲状腺功能减退、自身免疫性疾病和心脏缺陷。此外,AFP被广泛用作神经管缺陷和染色体异常的产前筛查标志物。出生后产生AFP与多种病理学有关。AFP是肝细胞癌的常用标志物,AFP水平升高与其他几种癌症(包括肝母细胞瘤、生殖细胞瘤和某些胃癌)一致。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中AFP的浓度。AFP捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的AFP会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠AFP抗体后,抗小鼠AFP抗体与AFP接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂,若样本中存在AFP将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,AFP浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中AFP浓度。

小鼠AFP 参考标准曲线

 

注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度,特异性和重复性:

1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量为59pg/ml

2.特异性:与小鼠的leptin, resistin, prolactin及人的α-Fetoprotein均没有交叉反应性。

3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.

参考文献:

1. Krantz, D.A. et al. (2010) Clin. Lab. Med. 30:721.

2. Mizejewski, G.J. (2013) Tumor Biol. 34:1317.

3. Andrews, G.K. et al. (1982) J. Biol. Chem. 257:5148.

4. Billmire, D.F. et al. (2014) J. Clin. Oncol. 32:465.

5. Mizejewski, G.J. (2004) Exp. Biol. Med. 229:439.

6. Canick, J.A. et al. (2003) Clin. Lab. Med. 23:385.