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小鼠_

mouse P-Selectin ELISA KIT

英文名称:mouse P-Selectin  ELISA KIT
中文名称:小鼠P选择素
产品货号: JEM-122
检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
规格:96T/48T
经营品牌:安徽巧伊生物
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月
运输条件:低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。

P-SELECTIN 简介:

小鼠P-选择素(GMP-140、LECAM-3、PADGEM、CD62P)是选择素家族的成员之一,是一种由活化血小板和内皮细胞表达的细胞表面糖蛋白。小鼠P-选择素cDNA编码768个氨基酸残基的I型跨膜蛋白,含有41个氨基酸信号肽、668个氨基酸胞外结构域、一个跨膜结构域和一个短(35个氨基酸)胞质结构域。人和小鼠P-选择素的胞外结构域具有约73%的序列同源性。

P-选择素在白细胞和中性粒细胞与内皮细胞的粘附中起作用。P-选择素与L-选择素协同作用,介导循环白细胞与内皮细胞的初始相互作用,产生内皮细胞上白细胞的特征性“滚动”。这一最初的相互作用之后是涉及E-选择素的更强的相互作用,以及后面是ICAM-1和VCAM-1等更强的相互作用,最终导致白细胞通过血管壁外渗到细胞外基质组织中。

据报道,P-选择素的可溶性形式为100-105 kDa,被认为是由蛋白水解裂解产生的。可溶性P-选择素被认为是促凝活性增强的标志物,并作为经典补体激活途径的选择性拮抗剂。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中P-SELECTIN的浓度。P-SELECTIN捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的P-SELECTIN会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠P-SELECTIN抗体后,抗小鼠P-SELECTIN抗体与P-SELECTIN接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂,若样本中存在P-SELECTIN将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,P-SELECTIN浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中P-SELECTIN浓度。

 

小鼠P-SELECTIN 参考标准曲线

 

注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度,特异性和重复性:

1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量为58pg/ml

2.特异性:与小鼠的E-selectin, L-selectin, ICAM-1, ICAM-2,VCAM-1均没有交叉反应,与人的P-selectin没有交叉反应性。

3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.

参考文献:

1. Bevilacqua, M. et al. (1991) Cell 67:233.

2. Yang, J. et al. (1999) Thromb. Haemost. 81:1.

3. Lowe, J.B. (1997) Kidney Intl. 51:1418.

4. Hartwell, D.W. et al. (1998) J. Cell Biol. 143:1129.

5. Andre, P. et al. (2000) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97:13835.

6. Johnston, G.I. et al. (1989) Cell 56:1033.