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大鼠TIMP-1 说明书

英文名称:Rat TIMP-1 ELISA Kit
中文名称:大鼠金属蛋白酶组织抑制因子1 
产品货号:JEM-072
检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
规格:96T/48T
经营品牌:安徽巧伊生物
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月
运输条件:低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。

TIMP-1简介:

金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)是MMPs家族的组织抑制剂,广泛分布于组织和体液中,共价结合MMPs而抑制其活性。TIMPs 家族有四个蛋白,TIMP1、 TIMP2、 TIMP3 和TIMP4, TIMP-1是一种可由许多不同种类细胞产生的分子量为28KD的糖蛋白,是一种重要的MMPs的抑制剂,与MMPs的酶原或活化后酶的催化区的羧基末端特异性结合,形成复合物,从而特异性抑制MMPs的水解活性。除了抑制MMPs外,TIMP-1在组织动态平衡中也起重要的作用

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中TIMP-1的浓度。TIMP-1捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的TIMP-1会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗大鼠TIMP1抗体后,抗大鼠TIMP-1抗体与TIMP-1接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂,若样本中存在TIMP1将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,TIMP-1浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中TIMP-1浓度.

 

                        大鼠TIMP-1参考标准曲线

 

                   img3
 

注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度,特异性和重复性:

1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量24pg/ml

2.特异性:与人TIMP-1TIMP-2TIMP-3TIMP-4TIMP-1等没有交叉反应。

3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.

参考文:

. 1. Mannello, F. and G. Gazzanelli (2001) Apoptosis 6:479.

2. Tanaka, T. et al. (1992) Mol. Cell. Endocrinol. 83:65.

3. Arihiro, S. et al. (2001) Histopathology 39:50.

4. Brew, K. et al. (2000) Biochim. Biophys. Acta 1477:267.

5. Johnson, M.D. et al. (1987) Mol. Cell. Biol. 7:2821.

6. Cook, T.F. et al. (1994) Arch. Biochem. Biophys. 311:313.