Mouse NGAL ELISA KIT（JEM－102）

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白简介：

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)又名Lipocalin2，属于lipocalin结合蛋白家族，也是中性粒细胞的中性粒颗粒的组成部分， NGAL由178个氨基酸残基组成的单体，其分子量大小为25kD。NGAL既能够自身聚合形成同源二聚体，也能够与MMP-9聚合形成异源二聚体。成熟的小鼠Lipocalin-2与人的和大鼠的Lipocalin-2分别有62%和81%的同源性。

NGAL在细胞分化、肿瘤形成以及细胞凋亡等过程中都有一定的作用。NGAL是促进多种细胞的生长、分化的重要因子，同时也是一个有效的抑菌剂。体内和体外实验表明，NGAL能够通过诱导Ras的活性控制Ras通路，从而将上皮细胞改造成间充质，影响乳腺肿瘤细胞的侵袭和转移行为。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中NGAL的浓度。NGAL捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的MMP-9会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗NGAL抗体后，抗NGAL抗体与NGAL接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂，若样本中存在NGAL将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，NGAL浓度与OD450值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中NGAL浓度。

NGAL参考标准曲线

注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度，特异性和重复性:

1.灵敏度：多次重复结果表明，最小检出量为7.9pg/ml。

2.特异性：与人Lipocalin-2、Lipocalin-1及大鼠的Lipocalin-2等均没有交叉反应。

3.重复性：板内，板间变异系数均<10%.

参考文献:

1. Lee, S. et al. (2007) J. Immunol. 179:3231.

2. Yan, Q-W. et al. (2007) Diabetes 56:2533.

3. Klausen, P. et al. (2005) Eur. J. Haematol. 75:332.

4. Saiga, H. et al. (2008) J. Immunol. 181:8521.

5. Yang, J. et al. (2002) Mol. Cell 10:1045.

6. Lee, S. et al. (2009) J. Neurosci. 29:234.