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Mouse ACE/CD143 ELISA KIT(EM-091)

英文名称:Mouse ACE/CD143 ELISA KIT
中文名称:血管紧张素转化酶
产品货号: JEM-091
检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
规格:96T/48T
经营品牌:安徽巧伊生物
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月
运输条件:低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。

血管紧张素转化酶简介:

血管紧张素转换酶(ACE,也称为肽基二肽酶A或CD143)是一种含锌金属的肽酶,对血压控制和水盐代谢非常重要。ACE作为一种Ⅰ型膜蛋白,可被分泌酶分泌,溶解于多种体液中,如血清、血浆、精液、羊水和脑脊液(1)。两个ACE异构体是从一个基因转录使用替代启动子(3)。体细胞ACE(sACE)存在于内皮细胞、上皮细胞和神经细胞中,而生殖血管紧张素转换酶(gACE)只存在于睾丸中。ACE-2,也称为ACE同源蛋白或ACEH,一种结构类似但功能不同的蛋白质。

ACE具有从游离C端的寡肽中切割C端二肽的作用。如血管紧张素转换酶可将血管紧张素I中切割C末端二肽,产生一种有效的血管升压药,八肽血管紧张素II。它还通过连续去除两个C-末端二肽使缓激肽失活,缓激肽是一种有效的血管扩张剂。

血管紧张素转换酶在免疫、生殖和神经肽调节中发挥着重要的作用。例如,ACE可降解阿尔茨海默病淀粉样β-肽(Aβ),延缓Aβ聚集、沉积、原纤维形成,并抑制细胞毒性。血管紧张素转换酶抑制剂现在临床上用于治疗高血压、充血性心力衰竭和心肌梗死、内皮功能障碍和肾病,包括糖尿病肾病。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中ACE的浓度。ACE捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的MMP-9会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗ACE抗体后,抗ACE抗体与ACE接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂,若样本中存在ACE将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,ACE浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中ACE浓度。

ACE参考标准曲线

注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度,特异性和重复性:

1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量为89pg/ml

2.特异性:与小鼠ACE2和人的ACE没有交叉反应。

3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.

参考文献:

1. Hu, J. et al. (2001) J. Biol. Chem. 276:47863..

2. Eyries, M. et al. (2001) J. Biol. Chem. 276:5525.

3. Alfalah, M. et al. (2001) J. Biol. Chem. 276:21105.

4. Corvol, P. et al. (2004) in Handbook of Proteolytic Enzymes (Barrett, A.J. et al., eds.) p. 332, Academic Press, San Diego

5. Kessler, S.P. et al. (2000) J. Biol. Chem. 275:26259.