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human beta Amyloid 40 ELISA Kit (JEH-171)

英文名称:human beta Amyloid 40 ELISA Kit
中文名称:人贝塔淀粉样蛋白肽40
产品货号:JEH-171
检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
规格:96T/48T
经营品牌:安徽巧伊生物
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月
运输条件:低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。

BETA AMYLOID 40 简介:

APP是一种多功能跨膜蛋白,由682个氨基酸(aa)构成的胞外区(ECD)、24氨基酸的跨膜段和47个氨基酸胞质区组成。APP可在多个位点发生蛋白水解,从而产生不同的ECD。APP被BACE(β-活性分泌酶)作用后得到Aβ序列的N端。这会释放一个稍短的ECD片段,称为APPbeta。淀粉样变性ECD脱落后,剩余部分被γ-分泌酶/早老素蛋白复合物在胞内进一步切割而产生Aβ肽1-40或1-42。

淀粉样β肽(Aβ)的原纤维的形成在阿尔茨海默病的病理过程中起着不可或缺的作用。Aβ原纤维是老年性痴呆患者脑内积聚的老年斑的主要蛋白质成分。在缺氧、创伤性脑损伤和慢性炎症的情况下,淀粉样斑块的积聚增加。Aβ肽对神经元有多种作用。

Aβ肽能在细胞内结合成二聚体、高阶寡聚体和不溶性纤维。在各种形式的Aβ中,寡聚物在损害认知功能、抑制海马神经元长时程增强(LTP)和诱导神经元氧化应激方面最为有效。相反,单体Aβ可以保护兴奋毒性神经元细胞的死亡。Aβ能直接破坏神经元膜的完整性。Aβ的神经毒性通过其体内糖基化或焦谷氨酰胺基化而增强。Aβ还可通过与TLR2的相互作用而诱导神经炎症。胞外Aβ可被脑啡肽酶或胰岛素溶解素等降解,Alzheimer病患者Aβ清除受损。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中BETA AMYLOID 40的浓度。BETA AMYLOID 40捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的BETA AMYLOID 40会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人BETA AMYLOID 40抗体后,抗人BETA AMYLOID 40抗体与BETA AMYLOID 40接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂,若样本中存在BETA AMYLOID 40将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,BETA AMYLOID 40浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中BETA AMYLOID 40浓度。

      人BETA AMYLOID 40参考标准曲线

注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度,特异性和重复性:

1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量为117pg/ml。

2.特异性:与人的淀粉样蛋白及大小鼠Amyloid β (aa1-42)等均没有交叉反应。

3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.

参考文献:

1. Vassar, R. et al. (1999) Science 286:735.

2. Brody, D.L. et al. (2008) Science 321:1221.

3. Cleary, J.P. et al. (2004) Nat. Neurosci. 8:79.

4. Walsh, D.M. et al. (2002) Nature 416:535.

5. Govoni, S. et al. (2014) Curr. Pharmaceut. Des. 20:2525.

6.  Hong, L. et al. (2010) J. Phys. Chem. B. 114:11261.