Mouse CCL8/MCP-2 ELISA KIT

CCL-8简介：

CCL-8又被称为单核细胞趋化因子2（MCP-2），是CC趋化因子的重要成员。细胞表面存在五种与CCL-8结合的受体，包括CCR1、CCR2、CCR3、CCR5、CCR8，其中CCR1与CCR5是介导CCL-8生物学效应的主要受体。CCL-8主要巨噬细胞分泌，也可由可由成纤维细胞、单核细胞、上皮细胞、血管内皮细胞和平滑肌细胞分泌。成熟的小鼠CCL-8则只有78个氨基酸。CCL-8与MCP1和MCP3的氨基酸序列同源性分别为62%和58%。

CCL-8对多种疾病都有重要临床意义。肺结核中，CCL-8的变化可作为一种重要诊断指标。肿瘤防治中，虽然CCL-8可以促进肿瘤细胞的转移，但也可通过招募淋巴细胞抑制肿瘤发生发展。HIV病毒感染中，由于CCL8可以与HIV-1竞争性结合CD4+T细胞表面的CCR5受体，从而可以抑制HIV对细胞的感染与复制。CCl-8与其他CC趋化因子家族成员一样，可通过趋化嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、T细胞等细胞而参与抗菌作用。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中小鼠CCL-8的浓度。小鼠CCL-8捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的小鼠CCL-8会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠CCL-8抗体后，抗小鼠CCL-8抗体与小鼠CCL-8接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂，若样本中存在CCL-8将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，小鼠CCL-8浓度与OD₄₅₀值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中CCL-8浓度。

   小鼠CCL-8参考标准曲线

注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度，特异性和重复性:

1.灵敏度：多次重复结果表明，最小检出量为15.2pg/ml。

2.特异性：与小鼠MCP-1，MCP-3，MCP-5等没有交叉反应。

3.重复性：板内，板间变异系数均<10%.

参考文献:

1.Laing K J, etal. (2004) Chemokines . Developmental and comparative immunology. 28(5):443-60.

2.Cocchi F, etal. (1995) Identification of RANTES , MIP-1a, and MIP-1b as the major HIV-suppressive factor produced by CD8+ T cells. Science .270 (5243) : 1811–5.

3. Hori T , etal . (2008) CCL8 is a potential molecular candidate for the diagnosis of graft-versus-host disease . Blood. 111 (8): 4403-12.