Mouse CCL1/TCA-3 ELISA KIT

CCL-1简介：

CCL-1也被称为I-309和TCA-3，是分泌的糖蛋白通过结合表面CCR8受体而活化的T淋巴细胞，单核细胞、NK细胞、未成熟的B细胞和树突状细胞。人类CCL-1与小鼠TCA-3是同系物，这两种蛋白质约有42%的氨基酸同源性，都含有一对半胱氨酸残基。TCA-3的cDNA编码了92个氨基酸的前体蛋白，包括23个氨基酸的信号肽及成熟蛋白的69个氨基酸的肽段。

TCA-3通过结合7个跨膜g蛋白偶联受体CCR8而起作用。 TCA-3已被证明具有化学吸引t细胞的作用。CCL-1参与多种肺部疾病的形成。CCL-1的高表达会导致肺部过敏性炎症物上调，中和CCL-1或敲除CCL-1受体（CCR8）会导致肺部黏膜炎症降低。CCL-1阻断抗体会引起CCL-1含量的减少，降低了免疫细胞的迁移率，抑制炎症细胞向肺部细胞的浸润，改善肺泡纤维化，已有实验证明CCL-1含量的增加会加重肺泡的纤维化。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中CCL-1的浓度。CCL-1捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的CCL-1会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠CCL-1抗体后，抗小鼠CCL-1抗体与CCL-1接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂，若样本中存在CCL-1将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，CCL-1浓度与OD₄₅₀值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中CCL-1浓度。

         小鼠CCL-1参考标准曲线

注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度，特异性和重复性:

1.灵敏度：多次重复结果表明，最小检出量为7.5pg/ml。

2.特异性：与小鼠MIP-1a，MIP-1b，TARC及的人I-309等没有交叉反应。

3.重复性：板内，板间变异系数均<10%.

参考文献:

1. Goya, I. et al. (1998) J. Immunol. 160:1975.

2. Burd, P. et al. (1987) J. Immunol. 139:3126.