Mouse PD-L1 ELISA Kit

PD-L1 简介：

程序性细胞死亡1配体1（PD-L1），也称为B7-H1或CD274，是不断发现的B7免疫蛋白家族的成员之一。成熟小鼠PD-L1由一个21氨基酸的跨膜片段、一个30氨基酸的细胞质结构域和221个氨基酸的细胞外结构域（ECD）组成，ECD包括一个V样和一个C样Ig结构域。从ECD来看，小鼠PD-L1与人和大鼠PD-L1分别具有73%和86%的氨基酸序列同源性。

PD-L1主要在巨噬细胞、T细胞、B细胞、角质形成细胞、内皮细胞和肠上皮细胞等具有炎症活性的免疫细胞中表达。PD-L1在促进淋巴组织中T细胞的成熟和分化方面发挥着重要作用。研究表明，PD-L1可以导致抗原特异性T细胞凋亡，并可能导致癌症细胞的免疫逃逸，所以PD-L1可作为自身免疫性疾病和恶性肿瘤的理想治疗靶点。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中PD-L1的浓度。PD-L1捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的PD-L1会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠PD-L1抗体后，抗小鼠PD-L1抗体与PD-L1接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂，若样本中存在PD-L1将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，PD-L1浓度与OD₄₅₀值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中PD-L1浓度。

        小鼠PD-L1参考标准曲

线

注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度，特异性和重复性:

1.灵敏度：多次重复结果表明，最小检出量为16.5pg/ml。

2.特异性：与小鼠B7-1，B7-2，B7-H2，B7-H3，B7-H4，PD-1，PD-L2等及人和大鼠PD-L1没有交叉反应。

3.重复性：板内，板间变异系数均<10%.

参考文献:

1. Park, J.J.et al. (2010) Blood 116:1291.

2. Dong, H. et al. (2002) Nat. Med. 8:793.

3. Tamura, H. et al. (2001) Blood 97:1809.

4. Tsushima, F. et al. (2007) Blood 110:180.

5. Kuang, D.M.et al. (2014) J. Clin. Invest. 124:4657.

6. Butte, M.J. et al. (2008) Mol. Immunol. 45:3567.