Mouse IL-36beta ELISA KI

IL-36β 简介：

小鼠IL36β/IL1F8是直接合成为183个氨基酸(aa)的活性蛋白，无前体蛋白形式，不含信号序列和潜在的Nlinked糖基化位点(s)。 小鼠IL36β/IL1F8与人类IL36β/IL1F8亚型2和大鼠IL1F8的同源性分别为61%和74%。 在IL1家族中，IL36β/IL1F8与IL1ra、IL1β、IL36Ra/ IL1F5、IL36α/IL1F6、IL36γ/IL1F9和IL1F10等蛋白的氨基酸序列同源性分别为33%、32%、35%、39%和28%。

IL-36β一般由角化细胞，幼稚CD4+细胞，神经元细胞及神经胶质细胞产生表达。IL-36β具有一般细胞因子的常见功能，IL-36β还能作为，幼稚CD4+细胞及骨基质的树突状细胞的迁移诱导剂。IL-36β能诱导骨基质的树突状细胞产生包括IL-12, IL-1β, IL-6和TNF-α等炎性因子。此外，IL-36β能协IL-12增强Th1型细胞的极化。在角化细胞的培养中，IL-36β能诱导巨噬细胞、T细胞和神经细胞等产生大量的细胞因子和抗菌肽，包括HBD-2, HBD-3, lipocalin 2, CAMP, elafin, serpinB1 和IL-8等。此外，在角化细胞培养中，还观察到MMP9和 MMP19的mRNA的表达上调。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-36β的浓度。IL-36β捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的IL-36β会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠IL-36β抗体后，抗小鼠IL-36β抗体与IL-36β接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂，若样本中存在IL-36β将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，IL-36β浓度与OD450值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中IL-36β浓度。

小鼠IL-36β参考标准曲线

注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度，特异性和重复性:

1.灵敏度：多次重复结果表明，最小检出量为13.6pg/ml。

2.特异性：与小鼠的IL-36α，IL-36γ，IL-1Rrp2， IL-36Ra及人的IL-36β等没有交叉反应。

3.重复性：板内，板间变异系数均<10%.

参考文献:

1. Dunn, E. et al. (2001) Trends Immunol. 22:533.

2. Dinarello, C. et al. (2010) Nat. Immunol. 11:973.

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4. Smith, D.E. et al. (2000) J. Biol. Chem. 275:1169.

5. Towne, J.E. et al. (2004) J. Biol. Chem. 279:13677.

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