Human HVEM/TNFRSF14 ELISA KIT

HVEM 简介：

疱疹病毒进入介导蛋白（HVEM），也称为TNFRSF14、ATAR 和CD270，是一种I型膜蛋白，属于TNF受体超家族。成熟的人类HVEM是一个164个氨基酸（aa）的胞外结构域（ECD），三个富含半胱氨酸的结构域（CRD）、一个21aa的跨膜片段和一个60氨基酸的带有TRAF相互作用结构域的细胞质尾部组成。在ECD部分，人HVEM蛋白与大鼠，小鼠在氨基酸水平上有55%同源性。

HVEM主要在各类免疫细胞上表达，如T和B细胞、NK细胞、单核细胞和中性粒细胞等。HVEM蛋白作为的受体可与B和T淋巴细胞表面的BTLA、CD160、LIGHT/TNFSF14和淋巴毒素α等结合。研究表明HVEM与T细胞上的LIGHT（TNFSF114）结合后，提供刺激信号，但当HVEM蛋白与BTLA或CD160结合时，会起到抑制作用。此外，研究表明，HVEM可以与上皮内淋巴细胞（IEL）表达的CD160结合，促进上皮完整性和宿主对肠上皮细胞的防御。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中HVEM 的浓度。HVEM 捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的HVEM 会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人HVEM 抗体后，抗人HVEM 抗体与HVEM 接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂，若样本中存在HVEM 将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，HVEM 浓度与OD₄₅₀值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中HVEM 浓度。

     人肿瘤坏死因子受体家族蛋白14参考标准曲线

1.灵敏度：多次重复结果表明，最小检出量为13.8pg/ml。

2.特异性：与人CD40/Fc Chimera，TNF-β，TNF RI及小鼠HVEM等没有交叉反应性

3.重复性：板内，板间变异系数均<10%.

参考文献:

1. Shui, J.W. et al. (2012) Nature 488:222.

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5. Ye, Q. et al. (2002) J. Exp. Med. 195:795.

6. Steinberg, M.W. et al. (2013) PLoS One 8:e77992.