Human P-Selectin ELISA KIT

P-Selectin简介：

P-选择素（GMP-140、LECAM-3、PADGEM、CD62P）是选择素家族的成员之一，是一种由活化血小板和内皮细胞表达的细胞表面糖蛋白。人P-选择素cDNA编码830个氨基酸残基的I型跨膜蛋白，含有41个氨基酸信号肽、730个氨基酸胞外结构域、一个跨膜结构域和一个短（35个氨基酸）胞质结构域。人和小鼠P-选择素的胞外结构域具有约73%的序列同源性。

P-选择素在白细胞和中性粒细胞与内皮细胞的粘附中起作用。P-选择素与L-选择素协同作用，介导循环白细胞与内皮细胞的初始相互作用，产生内皮细胞上白细胞的特征性“滚动”。这一最初的相互作用之后是涉及E-选择素的更强的相互作用，以及后面是ICAM-1和VCAM-1等更强的相互作用，最终导致白细胞通过血管壁外渗到细胞外基质组织中。

据报道，P-选择素的可溶性形式为100-105 kDa，被认为是由蛋白水解裂解产生的。可溶性P-选择素被认为是促凝活性增强的标志物，并作为经典补体激活途径的选择性拮抗剂。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中P-Selectin的浓度。P-Selectin捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的P-Selectin会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人P-Selectin抗体后，抗人P-Selectin抗体与P-Selectin接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂，若样本中存在P-Selectin将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，P-Selectin浓度与OD450值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中P-Selectin浓度。

          人P-Selectin参考标准曲线

注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度，特异性和重复性:

1.灵敏度：多次重复结果表明，最小检出量为113pg/ml。

2.特异性：与人的E-selectin, L-selectin均没有交叉反应,与的小鼠P-selectin有0.4%的交叉反应性。

3.重复性：板内，板间变异系数均<10%.

参考文献：

1. Sako, D. et al. (1993) Cell 75:1179.

2. Tedder, T.F. et al. (1995) FASEB J. 9:866.

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4. Takeda, I. et al. (1994) Allergy Immunol. 105:128.

5. Ikeda, H. et al. (1994) Coron. Artery Dis. 5:515.

6. Gearing, A.J.H. and W. Newman (1993) Immunol. Today 14:506.