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Rabbit TNF-α ELISA KIT

英文名称:Rabbit TNF-α ELISA KIT
中文名称:兔肿瘤坏死因子α
产品货号:JERA-03
检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
规格:96T/48T
经营品牌:安徽巧伊生物
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月
运输条件:低温运输,用干冰或者冰袋低温运输

TNF-α简介:

肿瘤坏死因子(TNF-α)是由单核细胞和巨噬细胞产生的多肽类细胞因子,在炎症反应、免疫系统的发展、细胞程序性死亡和脂代谢中起重要的作用。兔TNF-α35个氨基酸的胞内部,21个氨基酸的穿膜部分,179个氨基酸的胞外部分组成,从ECD部分来说,兔TNF-α与牛,猫,马,小鼠,猪,大鼠和恒河猴等TNF-α76%~83%的氨基酸同源性。

TNF-α功能主要是在免疫反应中是一个多功能的调节器甚至作为一个强烈的热原性物质刺激中性粒细胞,改变血管内皮细胞的特性,调节其它组织的代谢活性。TNF-α也可通过抑制脂蛋白脂肪酶的活性而导致恶液病。爱泼斯坦病毒引起的B细胞活化也可被TNF-α所抑制。巨噬细胞表面的淋巴因子和肉毒素也可介导包括上皮细胞、内皮细胞和肿瘤细胞等产生TNF-α。据报道干扰素能显著提高TNF-α的分泌量。

TNF-α在关节炎和其它组织的炎症的发病机理中起重要作用。TNF-α也参与了包括哮喘、克罗恩氏病、类风湿性关节炎、神经性疼痛、肥胖症、型糖尿病、自身免疫病和肿瘤等疾病的发生

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中兔TNF-α的浓度。兔TNF-α捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的兔TNF-α会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗兔TNF-α抗体后,抗兔TNF-α抗体与兔TNF-α接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂,若样本中存在TNF-α将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,兔TNF-α浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中TNF-α浓度。

TNF-α参考标准曲线

注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度,特异性和重复性:

1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量为28.4pg/ml

2.特异性:与人TNF-α、大鼠TNF-α、小鼠TNF-α、猪TNF-α等没有交叉反应。

3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.

参考文献:

1. Schall, T.J. et al. (1990) Cell 61:361.

2. Ito, H. et al. (1986) DNA 5:157.

3. Perez, C. et al. (1990) Cell 63:251.

4. Dembic, Z. et al. (1990) Cytokine 2:231.

5. Moss, M.L. et al. (1997) Nature 385:733.

6. Loetscher, H. et al. (1991) J. Biol. Chem. 266:18324.