GDF-8 ELISA KIT

GDF-8简介：

生长分化因子8（GDF-8），也称为肌生长抑制素，是一种分泌型TGF-β超家族蛋白之一。GDF-8分泌的前体是376氨基酸（aa）的前蛋白，由24个aa信号肽、243个aa前肽和109个aa成熟蛋白组成。分泌的前蛋白被BMP-1家族蛋白酶分解，形成12kDa生物活性成熟蛋白和35-40kDa前肽。在前肽中，小鼠GDF-8与人和大鼠GDF-8的氨基酸序列同源性分别为96%和99%。在人、小鼠和大鼠中成熟GDF-8蛋白的氨基酸序列是100%保守的。

肌生长抑制素在生长发育的骨骼肌和成年骨骼肌中表达。肌生长抑制素是骨骼肌质量的有效负性调节因子，心肌梗死后，肌生长抑制素可以控制心肌梗死区周围心肌细胞的成肌细胞增殖和上调。肌肉生长抑制素由机械刺激引起的应激的心肌细胞释放，并诱导心力衰竭常见的骨骼肌萎缩。GDF-8遗传物质缺失或敲除可导致能量平衡和代谢的多重变化，包括增加脂肪酸氧化和棕色脂肪形成，减少白色脂肪积累和循环胆固醇和甘油三酯水平，增加外周胰岛素敏感性和对饮食诱导肥胖的抵抗力。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中GDF-8的浓度。GDF-8捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的GDF-8会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗GDF-8抗体后，抗GDF-8抗体与GDF-8接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂，若样本中存在GDF-8将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，GDF-8浓度与OD₄₅₀值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中GDF-8浓度。

              GDF-8参考标准曲线

注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

1.灵敏度：多次重复结果表明，最小检出量为29.4pg/ml。

2.特异性：与人Activin RIIB/Fc Chimera，GASP-2，GDF-11等没有交叉反应。   3.重复性：板内，板间变异系数均<10%.

参考文献:

1. Hill, J.J. et al. (2003) Mol. Endocrinol. 17:1144.

2. McPherron, A.C. et al. (1997) Nature 387:83.

3. Heineke, J. et al. (2010) Circulation 121:419.

4. Yang, J. et al. (2001) Mol. Reprod. Dev. 60:351.

5. Lee, S.J. et al. (2010) Immunol. Endocr. Metab. Agents Med. Chem. 10:183.