Porcine IFN-γ ELISA KIT

猪IFN-γ简介：

被称为II型干扰素的IFN-γ，是由143个残基构成的，有20和25kDa亚型的糖蛋白，以头尾相连的同型糖蛋白的形式存在。成熟的猪IFN-γ存在非共价结合的同型二聚体，由于糖链不同，分子量分别在20~25 kDa。成熟的猪IFN-γ与牛，犬，马，猫等分别有72%~79%的同源性，与棉鼠，人，小鼠，大鼠及恒河猴等有41%~57%的同源性。

IFN-γ由T淋巴细胞和NK细胞产生，用以抗病毒和干扰增殖，此外，IFN-γ还有与免疫调节相关的几种功能包括调节细胞的增殖和程序性死亡，刺激或抑制不同基因的表达。IFN-γ能通过诱导产生吲哚胺2，3-双加氧酶来抗弓形虫和衣原体的感染。IFN-γ是效应强烈的单核吞噬细胞增强剂，IFN-γ是通过增强单核吞噬细胞的Mac-1的表达来达到增强胞饮作用和吞噬作用的。IFN-γ通过增加巨噬细胞的氧自由基和TNF-α的释放来达到增强杀肿瘤细胞的作用。IFN-γ选择性地提高包括因LPS刺激的B细胞的IgG2a和因2型T细胞呈递抗原而引起的B细胞的IgG3的释放量。有报道称IFN-γ能引起细胞的自分泌IFN-γ作用的增强。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IFN-γ的浓度。IFN-γ捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的IFN-γ会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗猪IFN-γ抗体后，抗猪IFN-γ抗体与IFN-γ接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂，若样本中存在IFN-γ将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，IFN-γ浓度与OD450值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中IFN-γ浓度。

猪IFN-γ参考标准曲线

注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度，特异性和重复性:

1.灵敏度：多次重复结果表明，最小检出量为51pg/ml。

2.特异性：与猪IL-6，TNF-α以及小鼠IFN-γ,大鼠IFN-γ,人IFN-γ,狗IFN-γ,猫IFN-γ等没有交叉反应。

3.重复性：板内，板间变异系数均<10%.

参考文献:

1. Schroder, K. et al. (2004) J. Leukoc. Biol. 75:163.

2. Krause, C.D. et al. (2000) J. Biol. Chem. 275:22995.

3. Kelchtermans, H. et al. (2008) Trends Immunol. 29:479.

4. Pestka, S. et al. (2004) Immunol. Rev. 202:8.

5. McLaren, J.E. and D.P. Ramji (2009) Cytokine Growth Factor Rev. 20:125.

6. Dijkmans, R. et al. (1990) Nucl. Acids Res. 18:4259.