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小鼠_

mouse G-CSF ELISA KIT

英文名称:mouse G-CSF ELISA KIT
中文名称:小鼠粒细胞集落刺激因子
产品货号: JEM-161
检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
规格:96T/48T
经营品牌:安徽巧伊生物
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月
运输条件:低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。

G-CSF简介:

粒细胞集落刺激因子(G-CSF)是一个由噬中性粒细胞和单核细胞受刺激或抵抗细菌感染后产生的天然细胞因子,主要由单核细胞和巨噬细胞在内毒素、TNF-α和 IFN-γ等的刺激后产生。在受脂蛋白、IL-1 TNF-α等刺激后,一些如成纤维细胞、内皮细胞、星形胶质细胞、骨基质细胞等类型的细胞都可分泌G-CSF,此个,各类肿瘤细胞系和髓系白血病细胞也能分泌G-CSF

小鼠G-CSF cDNA编码含30个信号肽的一段208氨基酸的前体蛋白,经裂解后,成熟的G-CSFO位糖基化位点,两个内部二硫键的178个氨基酸蛋白。小鼠和人的G-CSF在氨基酸水平上有76%的同源性。

在人类来说,G-CSF蛋白可由两个活性明显有差异的异构体,分别来源于207个氨基酸的前体蛋白和204个氨基酸的前体蛋白。两者均有30个氨基酸的信号肽,除了在N末端第35位有3个插入的氨基酸的区别外,两个蛋白有相同的蛋白序列。据报道前体是204个氨基酸的成熟蛋白的活性比前体为207的成熟蛋白活性强十倍。

G-CSF已证明有好几方面的治疗应用,包括治疗新生儿感染、急性心肌梗塞、粒细胞减少症中粒细胞静脉注射、严重的感染和脓毒症、自身免疫性的粒细胞减少症,急性髓系白血病的治疗、艾滋的治疗及斯维茨综合症的治疗等。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中小鼠G-CSF的浓度。小鼠G-CSF捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的小鼠G-CSF会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠G-CSF抗体后,抗小鼠G-CSF抗体与小鼠G-CSF接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂,若样本中存在G-CSF将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,小鼠G-CSF浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中G-CSF浓度。

 

             小鼠G-CSF参考标准曲线

注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度,特异性和重复性:

1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量为27.4pg/ml

2.特异性:与人G-CSF,CNTF及小鼠的CT-1IL-6LIFIL-11Leptin等没有交叉反应。

3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.

参考文献:

1. Aritomi, M. et al. (1999) Nature 401:713.

2. Metcalf, D. (1986) Blood 67:257.

3. Fukunaga, R. et al. (1990) Cell 61:341.

4. Liu, F. et al. (2000) Blood 95:3025.

5. Nagata, S. et al. (1986) Nature 319:415.

6. Semerad, C.L. et al. (1999) Immunity 11:153