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Human TPO ELISA KIT

英文名称:Human TPO ELISA KIT
中文名称:血小板生成素
产品货号:JEH-262
检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
规格:96T/48T
经营品牌:安徽巧伊生物
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月
运输条件:低温运输,用干冰或者冰袋低温运输

TPO简介:

人血小板生成素(Tpo),也称为巨核细胞生长发育因子(MGDF)、巨核细胞集落刺激因子(MK-CSF),TPO是一种60-70 kDa、332个氨基酸(aa)残基的糖基化多肽。人类Tpo与大鼠、小鼠和狗Tpo的aa同源性分别为75%、73%和76%。

Tpo分子主要由肝细胞和骨髓基质细胞分泌。TPO分子在结构和功能上可分为N端和C端两部分。Tpo的N端半部分在结构上类似于促红细胞生成素(Epo)分子,,这个区域被认为是受体结合的负责区域。C末端区域包含许多潜在的N-连接糖基化位点。C末端被认为有助于整体分子稳定性和循环半衰期

Tpo似乎增加了巨核细胞的绝对数量,增加了巨核细胞的活力,并缩短了细胞周期所需的时间。Tpo似乎不促进血小板形成。虽然Tpo水平可能由巨核细胞计数调节,血小板可能在调节血浆Tpo水平中发挥作用,但血小板计数与血液Tpo水平之间似乎没有直接相关性。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中TPO 的浓度。TPO 捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的TPO 会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人TPO 抗体后,抗人TPO 抗体与TPO 接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂,若样本中存在TPO 将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,TPO 浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中TPO 浓度。

 

                人TPO参考标准曲线

注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度,特异性和重复性:

1.灵敏度:多次重复结果表明,最小检出量为70.4pg/ml

2.特异性:与人的EPO,EPO R/Fc Chimera,TPO R/Fc Chimera及小鼠的EPOTPO均无交叉反应性

3.重复性:板内,板间变异系数均<10%.

参考文献:

1. Ogami, K. et al. (1995) Gene 158:309.

2. Shinohara, A. et al. (1996) Oncology 53:426.

3. Angchaisuksiri, P. et al. (1996) Br. J. Haematol. 93:13.

4. Wendling, F. et al. (1994) Nature 369:571.

5. Bartley, T.D. et al. (1994) Cell 77:1117.

6. Debli, N. et al. (1995) Blood 85:391.