Human Semaphorin 3E ELISA KIT

Semaphorin 3E简介：

信号素3E（Sema3E；也称为SemaH和Collectin-5）是信号素家族中85-90kDa的成员。人Sema 3E前体蛋白有775氨基酸（aa），包括一个25个aa的信号序列和一个750个aa的成熟蛋白的片段。人Sema 3E是以共价键连接的同型二聚体的分泌糖蛋白。成熟的人类Sema 3E与小鼠Sema 3E有91%的氨基酸序列同源性。据报道，能够分泌Sema 3E的细胞包括黑色素细胞、足细胞、胸腺髓质细胞、嗅球的簇状细胞和二尖瓣细胞、胚胎中胚层细胞和脊髓运动神经元细胞等。

Sema 3E在多个系统发育中参与“排斥”和“吸引/允许”的生理活动。如，Sema 3E可阻断由VEGF启动的血管生成，这可能是Sema 3E能够将NP-1吸引到其D1受体，从而去除VEGF R2信号复合物的关键成分。在脊髓发育过程中，本体感觉（关节感觉）感觉神经元的生长轴突通过Sema3E和D1复合物和其他未定义的Sema:plexin组合的协同作用，从而定向到适当的运动神经元突触。在胸腺细胞发育过程中，未确定的胸腺髓质细胞表达Sema3E。在双阳性（DP）阶段，皮质DP胸腺细胞为D1+，而Sema3E被认为可以阻止此类细胞进入髓质。成熟为单阳性细胞后，膜胸腺细胞D1表达下调，胸腺细胞迁移障碍消除。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中Semaphorin 3E 的浓度。Semaphorin 3E 捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的Semaphorin 3E 会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人Semaphorin 3E抗体后，抗人Semaphorin 3E抗体与Semaphorin 3E接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂，若样本中存在Semaphorin 3E将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，Semaphorin 3E浓度与OD₄₅₀值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中Semaphorin 3E 浓度。

          人SEMAPHORIN 3E参考标准曲线

注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度，特异性和重复性:

1.灵敏度：多次重复结果表明，最小检出量为484pg/ml。

2.特异性：与人Neuropilin-2/Fc Chimera, Plexin D1, Semaphorin 3B/Fc Chimera, Semaphorin 3C/Fc Chimera, Semaphorin 3D/Fc Chimera, Semaphorin 3F, Semaphorin 4A/Fc Chimera, Semaphorin 4B/Fc Chimera等没有交叉反应。 

3.重复性：板内，板间变异系数均<10%.

参考文献:

1. Guan, F. et al. (2006) Kidney Int. 69:1564.

2. Soker, S. et al. (1998) Cell 92:735.

3. GenBank Accession # BAG64853.

4. Choi, Y.I. et al. (2008) Immunity 29:888.

5. Chauvet, S. et al. (2007) Neuron 56:807.

6. Christensen, C. et al. (2005) Cancer Res. 65:6