Human CD8 alpha ELISA KIT

CD8 α简介：

CD8，也称为Ly2或Leu2，是一种广泛表达于CTL上的非多形性分子的细胞表面糖蛋白，作为多态性T细胞受体（TCR）的共受体，通过与主要组织相容性复合体（MHC）I类蛋白的恒定区域结合，在抗原识别中发挥作用。CD8分子有两种异构体，αβ异二聚体和αα同二聚体，它们具有不同的生化结构和组织分布特征。在人体内，只有α链，所以认为人CD8是同型二聚体。α和β亚基均由单个N端胞外Ig超家族（IgSf）V结构域、膜近端铰链区、单程跨膜结构域和C端胞质尾组成（Zamoyska，1994）。在，人类CD8α与小鼠CD8α胞外区氨基酸序列有49%的同源性。

CD8α二聚体选择性表达于某些自然杀伤细胞（NK）、CD4+ T细胞亚群、肠上皮内淋巴细胞（IEL）、树突状细胞和单核细胞亚群（其中大多数细胞参与抵抗细菌和病毒感染的免疫应答），是细胞免疫应答检测和某些免疫工具箱开发的有用标记物。此外，CD8是CD8+T细胞的标志物，在细胞表面表达，参与病毒清除、抗原提呈和免疫反应。研究表明，CD8糖蛋白在T细胞发育和T细胞活化中起重要作用。它与细胞表面呈现肽的HCl I类蛋白质的恒定区域相互作用，稳定相互作用，通过CD3链酪氨酸磷酸化途径增强TCR激活，并在T细胞激活过程中的调节信号转导中发挥作用。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中CD8 ALPHA 的浓度。CD8 ALPHA 捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的CD8 ALPHA 会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人CD8 ALPHA 抗体后，抗人CD8 ALPHA 抗体与CD8 ALPHA 接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂，若样本中存在CD8 ALPHA 将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，CD8 ALPHA 浓度与OD₄₅₀值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中CD8 ALPHA 浓度。

人CD8 α参考标准曲线

注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度，特异性和重复性:

1.灵敏度：多次重复结果表明，最小检出量为17.2pg/ml。

2.特异性：与人CD4,CD59及小鼠CD8α等没有交叉反应。 

3.重复性：板内，板间变异系数均<10%.

参考文献:

1. Germain, R.N. (2002) Nat. Rev. Immunol. 2:309.

2. Lin, T.J. et al. (1998) J. Immunol. 161:6265.

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4. Vremec, D. et al. (1992) J. Exp. Med. 176:47.

5. Belz, G.T. et al. (2004) J. Immunol. 172:1996.

6. Cole, D.K. et al. (2012) Immunology 137:139.